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本試劑盒采用多重熒光PCR技術，針對牛奶中9種主要致病菌特有的基因的序列，設計不同熒光標記的探針，通過熒光信號的變化檢測牛奶中是否含有特定的致病菌。該試劑盒適用于多種樣本（如牛奶、肉組織、臟器、組織滲出液、全血或血清、尿液、糞便等）中金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、化膿棒狀桿菌、肺炎克雷伯桿菌、無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌和支原體等9種重要致病菌特異性基因的檢測。

儲存條件及有效期：試劑盒置于-20℃冰箱中凍存，試劑盒有效期為一年。

產品特點 Features

操作流程 process

牛乳房炎9種致病菌熒光PCR檢測試劑盒使用方法：

1）從試劑盒中取出水、PCR反應液、P溶液、陽性和陰性核酸對照，室溫融化，置冰箱4℃待用。

2）取待檢牛奶樣本（1000 μL）用柱法或磁珠法提取DNA，并溶于100 μL水中。

3）反應體系配制：試劑使用前，振蕩混勻，3000rpm離心2秒。1份牛奶DNA溶液使用3種不同P溶液（P1、P2、P3）分別進行檢測

在0.2mL平蓋PCR薄壁管或平蓋PCR八聯管中，按上述加樣量配制反應體系液（陽性和陰性對照管同樣配制，待檢DNA溶液換為試劑盒提供的陽性核酸對照和陰性核酸對照，加樣量分別為3μL），蓋好管蓋，去除管中氣泡，并用離心機甩離，確保所有液體都在管底。將PCR 管放入熒光PCR檢測儀中。

4）熒光PCR檢測儀循環條件設定。

產品細節 Details

技術參數 parameter

質控標準：

陰性對照的CT值應等于None；同時陽性對照的CT值應小于30。

否則，此次試驗視為無效。（CT值應以S型曲線拐點的循環數為準）

結果判定：

1）CT值為None的樣本判定為陰性；CT值小于等于35的樣本判定為陽性。

2）CT值大于35的樣本建議重做。重做后樣本CT值小于等于35則判定為陽性，否則判定為陰性。

3）對于某些未呈現S型曲線，但本底較高的樣本，應判定為陰性。

實驗案例展示